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TF20141402

Neofect? siRNA transfection reagent

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Neofect™ siRNA transfection reagent

產品介紹

Neofect™ siRNA transfec on reagent 一款專門用于siRNA轉染試劑,轉染效率高,細胞毒性低,在多種細胞系及原代細胞中都表現出良好的轉染效果。

產品特征

 

轉染效率高;細胞毒性低;無需換液,操作簡單。

實驗流程  (以6孔板為例)

1.細胞鋪板

提前一天將細胞種植在6孔板中,以轉染時細胞密度30%-70%為宜。

 

2.siRNA制備(可選)

使用RNase-free ddH20 溶解 siRNA干粉,終濃度為 20 uM。

 

即使用125 plddH20溶解10D(約 33 g 或2.5 nM) siRNA干粉充分震蕩使其溶解

 

3.轉染合體制備

1)準備2個無菌 EP 管,各加入100 pL OPTI-MEM 培養液,

2)第一管加入5pL Neofect,輕柔混合10次。

3)另一管加入5uLsiRNA(20pM)溶液,振蕩混勻。4)將 Neofect混合液滴加到 siRNA 合液中,輕柔混,室溫靜置 30 min,轉染復合體制備完成4.細胞轉染

 

4.細胞轉染

1)轉染:將轉染復合體滴加入細胞培養液中,輕搖混勻,轉入CO2培養箱中繼續培養。

2)換液(可選):若有明顯細胞毒性,轉染 12-24 h,更換成新鮮的細胞培養液。

3)驗證:轉染24-48 h,利用qPCR或Western blot 檢測目的甚因表達水平

培養器皿

20uM siRNA(ul)

Neofectul

OPTI-MEM(ul)

24孔板

11-3

11-1.5

5050-100

6孔板

54-12

54-6

100100-200

Φ35mm培養皿

54-12

54-6

100100-200

Φ60mm培養皿

86-24

86-12

200200-400

 按照NeofectsiRNA(20uM)=1:1的體積混合,不同細胞可適當提高siRNA的用量進行優化。

儲存安全

常溫運輸,儲存于4℃,有效期18個月。

注:本產品僅供研究使用,不可用于人或動物的體外診斷與治療。
      For labortory use only. Not for diagmpstic or therapeutic use.

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